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產品詳情
  • 產品名稱:HUVEC人臍靜脈內皮細胞(原代細胞永生化)

  • 產品型號:P-X787
  • 產品**:派瑞曼
  • 產品文檔:
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簡單介紹:
HUVEC人臍靜脈內皮細胞(原代細胞永生化)公司正在出售的產品:HS683人腦膠質瘤細胞貼壁生長成纖維細胞樣HS683:HS683人細胞系組織來源:腦山羊elisa檢測試劑盒動物組織醛酮還原酶1E(aldo-keto reductase 1E)活性比色法定量檢測試劑盒
詳情介紹:

細胞接收后的處理:


1)收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1:2傳代。

HUVEC人臍靜脈內皮細胞(原代細胞永生化)


英文簡稱

規格

貨號

HUVEC:HUVEC

1×106

P-X787

產品詳情:


細胞別稱:HUV-EC-C; HUVEC

種屬來源:人

年齡性別:

組織來源:臍靜脈

生長特性:貼壁生長

細胞形態:上皮細胞樣

背景簡介:

生物等級:1

細胞規格:1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測:無

基因表達情況:

保藏機構:atcc

培養基:ECM專用培養基:

培養條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件:無血清凍存液,液氮儲存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。


一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備DMEM培養基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2)培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二.細胞處理:

1)凍存細胞的復蘇::將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜

。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:
1、棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。 
3、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存:收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。下面T25瓶為例:
1、細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。
3、將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

實驗原理:


公司正在出售的產品:

組蛋白H2A/S抗體

卷曲螺旋結構域蛋白10抗體 FSD1L

HIST1H2AH

微管相關蛋白單克隆抗體 Tau

5-羥色胺受體1E抗體

AF750標記的干擾素-γ/IFN-γ抗體 IFN gamma, Alexa Fluor 750 conjugated

5HT1E Receptor

AF680標記的ChAT膽堿乙酰轉移酶抗體 ChAT/Alexa Fluor 680

細胞表面趨化因子受體7抗體 CCR7

枯草溶菌素轉化酶1抑制劑抗體 PROSAAS

SIAH結合蛋白1抗體 PUF60

驅動蛋白家族成員22抗體 KIF22

TIGAR蛋白抗體 TIGAR

G蛋白偶聯受體64抗體 GPR64

葡萄糖轉運蛋白4抗體 GLUT4

HER2受體(N)抗體 HER2 receptor(NT)

冰凍切片組織CASPASE-9蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

有絲分裂驅動蛋白樣2B抗體 KIF2B

大鼠一氧化氮合酶運輸因子(NOSTRIN)elisa檢測試劑盒

載脂蛋白E抗體 Apolipoprotein E

通用型維生素A高效液相色譜法定量檢測試劑盒

紡錘體和著絲粒相關蛋白2抗體 SKA2

小鼠Slit源物2(Slit2)elisa檢測試劑盒

富含亮氨酸重復序列Nogo受體反應蛋白4抗體 LINGO4

apelin 12(AP12)elisa分析檢測試劑盒

小鼠末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)elisa分析檢測試劑盒

無脊椎動物和昆蟲細胞基質金屬(MMP)總活性熒光定量檢測試劑盒

HUVEC人臍靜脈內皮細胞(原代細胞永生化)大鼠高鐵血紅蛋白還原酶(MHBR)elisa檢測試劑盒

駱駝elisa檢測試劑盒免費代測

雞肺炎支原體(MP)抗體(IgG)elisa分析檢測試劑盒

小鼠肝細胞生長因子受體(c-MET/HGFR)elisa分析檢測試劑盒

土壤鋰(lithium)化學比色法定量檢測試劑盒

實驗步驟:


1 將目的基因構建到合適的慢病毒載體上,利用293T細胞進行慢病毒包裝,獲得含目的基因的慢病毒;
2 轉染前24 h進行細胞鋪板,轉染時細胞密度控制在80%左右;
3 天加入適量病毒懸液感染細胞,并置于37 ℃,5% CO2培養箱中孵育;
4 24 h后用新鮮培養基替換含有病毒的培養基,并繼續培養;
5 在轉染3-4天后開始加藥篩選培養,直至顯微鏡下觀察熒光細胞比例為100%,獲得穩轉細胞系。


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