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ELISA實驗洗滌過程操作技巧小結
日期：2025-05-06 14:48
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摘要：
聚苯乙烯因其具有較強的吸附蛋白質的性能而被廣泛用于ELISA實驗的固相載體，聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的，因此需要通過洗滌清 除在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。洗滌在 ELISA 過程中雖不是一個反應步驟，但卻決定著實驗的成敗。上述提到的血清中存在紅細胞或纖維蛋白原，可以在加樣前離心時得到控制，同樣也可以通過適當增加洗滌次數和浸泡時間減輕或避免對實驗結果的影響，同樣，對于血液存在的非特異性的IgG,實驗者很難在加樣時將其去除，那么解決的佳時機就是洗滌過程。
ELISA在洗滌過程中需注...
聚苯乙烯因其具有較強的吸附蛋白質的性能而被廣泛用于ELISA實驗的固相載體，聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的，因此需要通過洗滌清 除在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。洗滌在 ELISA 過程中雖不是一個反應步驟，但卻決定著實驗的成敗。上述提到的血清中存在紅細胞或纖維蛋白原，可以在加樣前離心時得到控制，同樣也可以通過適當增加洗滌次數和浸泡時間減輕或避免對實驗結果的影響，同樣，對于血液存在的非特異性的IgG,實驗者很難在加樣時將其去除，那么解決的佳時機就是洗滌過程。
ELISA在洗滌過程中需注意以下幾點：
(1)、板要平整，尤其是在用洗板機洗板的過程中，往往是3排一起洗，如果板不平，就很可能造成洗液有殘留，從而導致非特異性結合不能清 除干凈，對實驗結果造成干擾。
(2)、洗液溫度，實驗表明，洗液溫度也會影響洗板的干凈程度，尤其是冬天溫度過低時容易出現“花板”問題。因此，好保持室溫在20℃-30℃。
(3)、洗液要注滿孔，孔壁洗滌不干凈也易造成“花板”現象。
(4)、洗液要新鮮配置，洗液要臨用前新鮮配制，放置時間過長易產生絮狀物或混濁，造成賭孔或花板。
(5)、洗板次數不夠或洗滌間隔時間過短也會造成由于洗板不凈而造成“花板”。