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注意事項:
服務流程:
產品名稱
規格
貨號
48T 0.1PCR管pNOS基因PCR檢測試劑盒
48T 0.1PCR管
BH-P64318
它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
方法
Cy7標記的兔抗小鼠IgMRabbit Anti-mouse IgM/Cy7 0.1ml
PE標記的兔抗小鼠IgMRabbit Anti-mouse IgM/PE 0.1ml
Alexa Fluor 647標記的兔抗小鼠IgMRabbit Anti-mouse IgM/Alexa Fluor 647 0.1ml
APC標記的兔抗小鼠IgMRabbit Anti-mouse IgM/APC 0.1ml
膠體金標記的兔抗小鼠IgMRabbit Anti-mouse IgM/Gold 0.5ml
Alexa Fluor 350標記的兔抗小鼠IgMRabbit Anti-mouse IgM/Alexa Fluor 350 0.1ml
Alexa Fluor 488標記的兔抗小鼠IgMRabbit Anti-mouse IgM/Alexa Fluor 488 0.1ml
Cy3標記的兔抗小鼠IgMRabbit Anti-mouse IgM/Cy3 0.1ml
FITC標記的兔抗小鼠IgMRabbit Anti-mouse IgM/FITC 0.3ml
羅丹明標記的兔抗小鼠IgMRabbit Anti-mouse IgM/RBITC 0.3ml
羅丹明標記的兔抗小鼠k鏈Rabbit anti-mouse Kappa light chain/RBITC 0.1ml
堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗小鼠k鏈Rabbit anti-mouse Kappa light chain/AP 0.1ml
膠體金標記的兔抗小鼠k鏈Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Gold 0.5ml
FITC標記的兔抗小鼠k鏈Rabbit anti-mouse Kappa light chain/FITC 0.1ml
48T 0.1PCR管pNOS基因PCR檢測試劑盒醋酸棉酚;Gossypol-acetic CAS 12542-36-8 訂購|咨詢 規格: 20mg
蒼術素;Atractylodin CAS 55290-63-6 訂購|咨詢 規格: 20mg
蝙蝠葛苷;Menisdaurin CAS 67765-58-6 訂購|咨詢 規格: 10mg
苯甲酰芍藥苷;benzoylpaeoni CAS 38642-49-8 訂購|咨詢 規格: 20mg
氧星;純品型;標準品;有證書 CAS 82419-36-1 訂購|咨詢 規格: 0.1g
丙草丹;純品型;標準品;有證書 CAS 759-94-4 訂購|咨詢 規格: 0.1g
乳禾草靈;純品型;標準品;有證書 CAS 77501-63-4 訂購|咨詢 規格: 0.1g
甲氧咪草煙;純品型;標準品;有證書 CAS 114311-32-9 訂購|咨詢 規格: 0.1g
酰胺;純品型;標準品-紋枯胺;有證書 CAS 66332-96-5 訂購|咨詢 規格: 0.1g
唑;純品型;標準品;有證書 CAS 88671-89-0 訂購|咨詢 規格: 0.1g
四聚;純品型;標準品;有證書 CAS 訂購|咨詢 規格: 0.1g
猛威;純品型;標準品;有證書 CAS 訂購|咨詢 規格: 0.1g
速磷;純品型;標準品;有證書 CAS 26718-65-0 訂購|咨詢 規格: 0.1g
高效(順式);純品型;標 CAS 72204-43-4 訂購|咨詢 規格: 0.1g
脫氫乙酸-對照品;有報告 CAS 520-45-6 訂購|咨詢 規格: 50mg
維生素B1(胺);純品型;標準品; CAS 24539 訂購|咨詢 規格: 0.25g
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
2. 引物和探針經過優化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據高度保守區設計,不會跟其他病毒的RNA發生交叉反應。
5. 本產品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應。
6. 本產品只能用于科研。
實驗方法步驟:
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。
Cy5.5標記的兔抗小鼠IgMRabbit Anti-mouse IgM/Cy5.5 0.1ml