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產品詳情
  • 產品名稱:RBL-2H3大鼠嗜堿細胞白血病細胞

  • 產品型號:P-X9423
  • 產品**:派瑞曼
  • 產品文檔:
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簡單介紹:
RBL-2H3大鼠嗜堿細胞白血病細胞公司正在出售的產品:SHI-1急性髓細胞白血病細胞 錯配修復蛋白2抗體 HLA-E ELISA Kit 類白細胞抗原定量elisa kit 半乳糖瓦爾登轉化酶抗體 SNU-75細胞
詳情介紹:

細胞接收后的處理:


1)收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1:2傳代。

RBL-2H3大鼠嗜堿細胞白血病細胞


英文簡稱

規格

貨號

RBL2H3

1×106

P-X9423

產品詳情:


細胞別稱;RBL2H3; RBL 2H3; RBL.2H3;大鼠嗜堿性白血病細胞

種屬來源;大鼠

組織來源;外周血;化學誘變嗜堿性細胞;白血病

生長特性;貼壁生長

細胞形態;成纖維細胞

細胞代數;10代以內

背景簡介;RBL-2H31978年國立牙科研究所的學實驗室從Wistar大鼠保持腫瘤狀態的嗜堿性細胞中分離和克隆出來的嗜堿性白血病細胞株。這些細胞具有高親和力的IgE受體。通過集聚這些受體或與鈣離子載體協同作用可以激活它們分泌組胺及其他遞質。這株細胞廣泛地用于研究肥大細胞FcERI和分泌的生化途徑。RBL-2H3細胞是研究FcERI結構的模型。它們廣泛地用于研究細胞分泌的不同方面,包括細胞內鈣濃度改變、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。雖然幾乎所有批號的FBS都支持細胞的生長,但在某些批號中FcERI集聚后脫粒化得更好。另一株大鼠嗜堿性細胞株(RBLATCC CRL-1378)不會脫粒化。

生物等級;1

細胞規格;1x106cells/T251mL凍存管

支原體檢測;無

保藏機構;ATCC; CRL-2256 DSMZ; ACC-312

培養基;MEM+15%FBS+PS

培養條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件;無血清凍存液,液氮儲存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。


一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備DMEM培養基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2)培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二.細胞處理:

1)凍存細胞的復蘇::將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜

。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:
1、棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。 
3、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存:收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。下面T25瓶為例:
1、細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。
3、將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

實驗原理:


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甘氨酸受體α3/GlyR α3抗體 Glycine Receptor alpha 3

跨膜γ羧基酸蛋白2抗體 PRRG2

干擾素誘導35蛋白抗體 IFI35

LASP1蛋白抗體 LASP1

KDELR3蛋白抗體 KDELR3

RBL-2H3大鼠嗜堿細胞白血病細胞驅動蛋白家族成員3B抗體 KIF3B

溶質載體家族22成員10抗體 SLC22A10

血清脊髓過氧化酶(MPO)活性高質敏感(DTNB)比色法定量檢測試劑盒

人α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)elisa檢測試劑盒

小鼠膠質細胞系來源神經營養因子(GDNF)elisa檢測試劑盒

實驗步驟:


1 將目的基因構建到合適的慢病毒載體上,利用293T細胞進行慢病毒包裝,獲得含目的基因的慢病毒;
2 轉染前24 h進行細胞鋪板,轉染時細胞密度控制在80%左右;
3 天加入適量病毒懸液感染細胞,并置于37 ℃,5% CO2培養箱中孵育;
4 24 h后用新鮮培養基替換含有病毒的培養基,并繼續培養;
5 在轉染3-4天后開始加藥篩選培養,直至顯微鏡下觀察熒光細胞比例為100%,獲得穩轉細胞系。


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