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產品詳情
  • 產品名稱:293FT人胚腎細胞

  • 產品型號:P-X631
  • 產品**:派瑞曼
  • 產品文檔:
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簡單介紹:
293FT人胚腎細胞公司正在出售的產品:SK-OV-3+LUC卵巢癌細胞熒光素酶標記 細胞周期檢測點激酶2抗體 E2 ELISA Kit 雌二醇定量elisa kit 舞蹈癥相關蛋白KALRN抗體 SNU-1105腦部多形性成釉細胞瘤細胞
詳情介紹:

細胞接收后的處理:


1)收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1:2傳代。

293FT人胚腎細胞


英文簡稱

規格

貨號

293FT

1×106

P-X631

產品詳情:


細胞名稱;293FT人胚腎細胞

種屬來源;人

組織來源;腎

生長特性;貼壁生長

細胞形態;上皮細胞樣

背景簡介;293FT細胞穩定表達SV40T抗原,并且促進適病毒產物的產生。

STR位點信息;AmelogeninXCSF1PO712D13S31712D16S539913D18S511718D19S4331518D21S1130.2D2S133819D3S13581517D5S81889D7S82011D8S11791214FGA23TH0179.3TPOX11vWA1619

細胞代數;10代以內

使用權限;A

細胞規格;1×106cells/T251mL凍存管

支原體檢測;無

保藏機構;ATCC; PTA-5077 ;中國醫學科學院基礎醫學研究所細胞資源中心

培養基;90% DMEM+10% FBS+PS

培養條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件;無血清凍存液,液氮儲存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。


一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備DMEM培養基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2)培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二.細胞處理:

1)凍存細胞的復蘇::將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜

。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:
1、棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。 
3、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存:收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。下面T25瓶為例:
1、細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。
3、將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

實驗原理:


公司正在出售的產品:

KIAA1191蛋白抗體

pJAK3檢測試劑盒

KIAA1191

POSTN檢測試劑盒

軟骨蛋白樣蛋白抗體

人骨膜蛋白/成骨細胞特異性因子2(POSTN)elisa分析檢測試劑盒

CHADL

p0 ELISA Kit

大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體β(PPAR-B/PPARD)elisa檢測試劑盒

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絲狀蛋白提取試劑盒(2D電泳用)100T

食蟹猴C(C-Peptide)elisa分析檢測試劑盒

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線粒體超氧化物歧化酶(Mn/Fe SOD)分離試劑盒

IL-22檢測試劑盒

氧固醇結合蛋白樣10抗體

組蛋白H3-K9mono/di/tri)甲基化檢測試劑盒

OSBPL10

小鼠谷胱甘肽S轉移酶θ1(GSTθ1)elisa檢測試劑盒

鈣結合蛋白樣39抗體

酵母核蛋白提取試劑盒50T

CAB39L

孕誘導阻斷因子抗體  Anti-PIBF

血栓調節蛋白抗體  Anti-Thrombomodulin/CD141

293FT人胚腎細胞蛋白激酶C亞型G抗體  Anti-PKC-γ/SCA14

絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SIK2抗體  Anti-SNF1LK2/SIK2

Mouse Anti-Rat IgG H&L / AP

堿性磷酸酶(AP)標記的小鼠抗大鼠IgG H&L

染色體結構維持蛋白4抗體

實驗步驟:


1 將目的基因構建到合適的慢病毒載體上,利用293T細胞進行慢病毒包裝,獲得含目的基因的慢病毒;
2 轉染前24 h進行細胞鋪板,轉染時細胞密度控制在80%左右;
3 天加入適量病毒懸液感染細胞,并置于37 ℃,5% CO2培養箱中孵育;
4 24 h后用新鮮培養基替換含有病毒的培養基,并繼續培養;
5 在轉染3-4天后開始加藥篩選培養,直至顯微鏡下觀察熒光細胞比例為100%,獲得穩轉細胞系。


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