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英文簡稱
規格
貨號
MOVAS:MOVAS
1×106
P-X1084
產品詳情:
細胞介紹
1999年12月通過膠原酶-彈性蛋白酶消化分離的原代血管主動脈平滑肌細胞用編碼SV40大T抗原以及新霉素抗性基因的逆轉錄病毒轉導。在 0.4 mg/ml G418 存在下選擇克隆并通過有限稀釋進行亞克隆。來源ATCC CRL-2797 可提供COA。
細胞特性
1)來源: C57BL/6小鼠心臟主動脈;平滑肌
2)形態:上皮細胞樣,多角形,貼壁細胞
3)含量:>1x106細胞數
4)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5)用途:僅供科研使用。所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要后方能丟棄。
2、建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產生飛揚的碎屑造成傷害。
使用范圍
本產品于科學研究,絕不可作為動物或人類的產品使用。
注意事項
1、收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
2、收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態,100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。
3、由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態,故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4、所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要后方能丟棄。
干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
1)收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1:2傳代。
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備DMEM培養基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2)培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二.細胞處理:
1)凍存細胞的復蘇::將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜
。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:1、棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。
3、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存:收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。下面T25瓶為例:
1、細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。
3、將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。
實驗原理:

實驗步驟:
1 將目的基因構建到合適的慢病毒載體上,利用293T細胞進行慢病毒包裝,獲得含目的基因的慢病毒;
2 轉染前24 h進行細胞鋪板,轉染時細胞密度控制在80%左右;
3 天加入適量病毒懸液感染細胞,并置于37 ℃,5% CO2培養箱中孵育;
4 24 h后用新鮮培養基替換含有病毒的培養基,并繼續培養;
5 在轉染3-4天后開始加藥篩選培養,直至顯微鏡下觀察熒光細胞比例為100%,獲得穩轉細胞系。
公司正在出售的產品:
過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體 |
磷酸肌醇3激酶接頭蛋白1抗體 |
PGC1 beta |
四分子交聯體17抗體(四旋蛋白) Anti-TSPAN17/FBX23 |
卷曲螺旋結構域蛋白25抗體 |
CCDC65 |
CCDC25 |
卷曲螺旋結構域蛋白65抗體 |
蛋白酶體PRS7抗體 Anti-Proteasome 19S S7 |
PIK3AP1 |
磷酸化心臟磷蛋白抗體 Anti-phospho-PLB/phospholamban(phospho Ser16+Thr17) |
Rabbit Anti-Human IgA / APC |
芳基磺基轉移酶1抗體 Anti-SULT1A1 |
長鏈脂肪酸延長酶長ELOVL6抗體 |
APC標記的兔抗人IgA |
ELOVL6 |
大鼠1,25二羥基維生素D3(1,25 DHVD3)elisa分析檢測試劑盒 |
受精卵抑制蛋白1樣蛋白抗體 Anti-ZAR1L |
25-dihydroxyvitamin D3 ELISA Kit |
NFKB激活蛋白抗體 Anti-NKAP |
人分泌型卷曲相關蛋白4(SFRP4)elisa分析檢測試劑盒 |
抵抗素抗體 Anti-Resistin |
HumanSFRP4ELISAKit |
Syndecan 3蛋白抗體 Anti-Syndecan 3 |
兔過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARA)elisa分析檢測試劑盒 |
豬多巴胺(DA)elisa分析檢測試劑盒 |
麥芽汁β-葡聚糖含量酶連續反應比色法定量檢測試劑盒 |
MOVAS小鼠主動脈血管平滑肌細胞大鼠信號素3A(SEMA3A)elisa檢測試劑盒 |
著絲粒蛋白X抗體 |
1號染色體開放閱讀框185抗體 |
MHF2/CENPX |
C1orf185 |