
咨詢電話:18117197628
細胞接收后的處理:
1)收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1:2傳代。
英文簡稱
規格
貨號
HS578T:HS578T
1×106
P-X771
產品詳情:
細胞別稱:HS 578T; Hs-578T; HS-578T; Hs_578t; Hs-578-T; HS-578-T; Hs 578.T; HS578T; Hs578T; Hs578t; HS0578T; 578T; HS578; Hs578; Homo sapiens No. 578, tumor cells;人乳腺癌細胞
種屬來源:人
年齡性別:女;74歲
組織來源:器官: :乳腺癌
生長特性:貼壁生長
細胞形態:成纖維細胞樣
背景簡介:Hs578T是混合多邊形形態,其中星狀細胞類型被選擇用于在通道和克隆。Hs578T細胞株源自癌。它與正常成纖維細胞樣細胞株Hs 578Bst起源于同一位患者。Hs 578T細胞株初是多角形的,但在傳代過程中選擇并克隆了星形的細胞形態:。電鏡下觀察到酪蛋白顆粒聚集,橋粒,緊密連接,脂質體和光滑內質網小泡。與Hs 578Bst一樣,未檢測到雌受體和內生病毒。
生物等級:1
細胞規格:1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測:無
基因表達情況:
保藏機構:ATCC; CRL-7849 ATCC; HTB-126 BCRC; 60120 DSMZ; ACC-781 ECACC; 86082104 ;中國典型培養物保藏中心細胞庫
培養基:90%DMEM+10%FBS+0.01mg/ml 牛胰島素+PS
培養條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件:無血清凍存液,液氮儲存
倍增時間:~36-54 hours
STR鑒定位點Hs578T是混合多邊形形態,其中星狀細胞類型被選擇用于在通道和克隆。Hs578T細胞株源自癌。它與正常成纖維細胞樣細胞株Hs 578Bst起源于同一位患者。Hs 578T細胞株初是多角形的,但在傳代過程中選擇并克隆了星形的細胞形態:。電鏡下觀察到酪蛋白顆粒聚集,橋粒,緊密連接,脂質體和光滑內質網小泡。與Hs 578Bst一樣,未檢測到雌受體和內生病毒。
干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
1)準備DMEM培養基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2)培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二.細胞處理:
1)凍存細胞的復蘇::將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜
。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:1、棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。
3、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存:收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。下面T25瓶為例:
1、細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。
3、將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。
實驗原理:

公司正在出售的產品:
甲狀腺受體相互作用蛋白8抗體 |
前列腺癌激活蛋白抗體 |
JMJD1C |
磷酸化翻譯控制腫瘤蛋白抗體 Anti-Phospho-TCTP(Ser46) |
第七號染色體開放閱讀框12抗體 |
CCDC139 |
CASD1/C7orf12 |
卷曲螺旋結構域蛋白139抗體 |
調亡誘導因子家族蛋白PEF1抗體 Anti-PEF1 |
PDZK3 |
PDZ結構域PDZK7蛋白抗體 Anti-PDZD7 |
Rabbit Anti-Pig IgG H&L / RBITC |
SCYL結合蛋白1抗體 Anti-SCYL1BP1 |
EIF1AD蛋白抗體 |
羅丹明標記的兔抗豬IgG H&L |
EIF1AD |
大鼠Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)elisa分析檢測試劑盒 |
胞質緊密粘連蛋白1抗體(閉鎖小帶蛋白1) Anti-ZO-1 |
PⅢNP ELISA Kit |
煙酰胺核苷酸轉氫酶抗體 Anti-NNT |
人鈣粘蛋白相關的神經受體1(CNR-1)elisa分析檢測試劑盒 |
磷脂酰乙醇胺結合蛋白1抗體 Anti-RKIP/PBP |
HumanCNR-1ELISAKit |
硫酸酯酶修飾因子1抗體 Anti-SUMF1 |
草酸含量試劑盒 |
小鼠白三烯B4(LTB4)elisa檢測試劑盒免費代測 |
冰凍切片組織COLLAGEN I蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 |
HS578T人乳腺癌細胞大鼠60kD熱休克蛋白(HSPD1)elisa檢測試劑盒 |
MED30蛋白抗體 |
1號染色體開放閱讀框110抗體 |
MED30 |
C1orf110 |
實驗步驟:
1 將目的基因構建到合適的慢病毒載體上,利用293T細胞進行慢病毒包裝,獲得含目的基因的慢病毒;
2 轉染前24 h進行細胞鋪板,轉染時細胞密度控制在80%左右;
3 天加入適量病毒懸液感染細胞,并置于37 ℃,5% CO2培養箱中孵育;
4 24 h后用新鮮培養基替換含有病毒的培養基,并繼續培養;
5 在轉染3-4天后開始加藥篩選培養,直至顯微鏡下觀察熒光細胞比例為100%,獲得穩轉細胞系。