需自備的儀器和用品：

高效液相色譜儀、示差折光檢測器、低速離心機、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器（水系，50個，0.22μm）、濾膜（水系1個，0.45μm）、

鈣柱（Carbomix Ca-NP10，7.8 ×300 mm）、可調式移液器、樣品瓶（50個，2mL）、超純水。

優點如下：

1、快速簡便：操作時間短，48-50T，可測40例樣本左右，96-100T,可測80例樣本左右；

2、取樣量微：常規操作取樣量50l， 酶標儀操作僅需5l即可檢測，部分試劑盒取樣多少請；

3、穩定性好：試劑盒2～8℃存放3個月有效；

4、再現性好：20倍稀釋線性仍然良好；

5、回收試驗： X =99%；

6、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強；

7、測試面廣：可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養細胞以及細胞培養上清液等，部分試劑盒適用于檢測植物。

測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產生氣泡

2.溫浴

1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。

優點如下：

1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。

2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。

5、再現性好：變異系數CV=1.7%。

6、回收試驗： X =103.3%。

7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。

8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。

雙料月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯（LST）  250g　PRTFDC1 抗體, 兔多抗 ELISA    400 μg

**液中和肉湯 Disinfectant Neutralization Broth 250g　CALCA / CGRP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 μg

卵磷脂吐溫稀釋液 Lecithin polysorbate(LP)diluent 250g　Actopaxin 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 μg

A-1培養基 A-1 Medium 250g　Actopaxin 抗體, 兔多抗 ELISA    400 μg

M-Endo肉湯 M-Endo Broth 250g　Tubulin folding cofactor A 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 μg

CCFA瓊脂基礎 CCFA Agar Base 250g　Actopaxin 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   WB   IP   50 μg

雙料乳糖膽鹽發酵培養基 Double Lactose Bile Medium 250g　CFHR2 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 μg

腸道增肉湯 Mossel-Enterobacteriaceae Enrichment Broth 250g　ING5 抗體, 兔單抗 ELISA   WB   IP   50 μg

MSA培養基 MSA Medium 250g　ING5 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   WB    50 μg

瓊脂培養基F(紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂) Agar Medium F(Violet Red Bile Glucose Agar) 250g　ING5 抗體, 兔多抗 ELISA    400 μg

腸道富集肉湯培養基（USP） Enterobacteria Enrichment Broth-Mossel 250g　ABHD14B 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA   IHC-P    50 μg

革蘭氏陰性增液 Gram Negative Bacteria Enrichment Broth 250g　ABHD14B 抗體, 兔單抗 WB   IP    50 μg

大腸桿噬體MS2液體培養基 Coliphage MS2 Liquid Medium 250g　BLOC1S2 / BLOS2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 μg

糜蛋白酶測試盒Layilin  透明質酸受體抗體規格: 0.1ml

LAIR-2/CD306  白  相關球蛋白樣受體2抗體規格: 0.1ml

LC3B/MAP LC3β/MAP1A  自噬微管相關蛋白輕鏈3抗體規格: 0.1ml

LC3 α/MAP1A/MAP LC3 Alpha/Beta  自噬微管相關蛋白輕鏈3抗體規格: 0.1ml

LASS1  長壽相關基因lASS1抗體規格: 0.2ml

phospho-MAP1LC3A(Ser12)  磷酸化自噬微管相關蛋白輕鏈3抗體規格: 0.1ml

LASS2  腫瘤轉移抑制基因1抗體規格: 0.2ml

LASS3  長壽相關基因lASS3抗體規格: 0.2ml

LASS4  長壽相關基因lASS4抗體規格: 0.2ml

LASS5  長壽相關基因lASS5抗體規格: 0.2ml

LASS6  長壽相關基因lASS6抗體規格: 0.2ml

LCAT  卵磷酯膽固醇酰基轉移酶抗體規格: 0.2ml

LATS1  腫瘤抑制基因LATS1抗體規格: 0.2ml

注意事項：

①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。

⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。