產品名稱：腸道病毒熒光PCR檢測試劑盒

貨號：BH-P64458
服務流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。

它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經過優化，靈敏性高。
3. 提供陽性對照，便于區分假陰性樣品。
4. 特異性高，引物是根據高度保守區設計，不會跟其他病毒的RNA發生交叉反應。
5. 本產品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應。
6. 本產品只能用于科研。

實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（*好用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數值為橫軸，繪制標準曲線。
Ai-p-PKC beta 1/2/FITC 熒光su標記磷suan化蛋白激meiC β1/β2抗體IgGMulti-class aibodies： 0.2ml

Horse IgG (親和純化) 馬IgGMulti-class aibodies： 10mg

庚型肝炎病毒抗體 Ai-HGV 0.2ml

Rabbit ai-mouse Kappa light chain 兔抗小鼠k鏈 1mg

FAM92A1 英文名稱： FAM92A1蛋白抗體 0.2ml

Rhesus aibody Rh phospho-ROCK2(Tyr256) 磷suan化Rho相關蛋白激mei2抗體  0.1ml

Horse IgG (親和純化) 馬IgGMulti-class aibodies： 10mg

ANG 人血管緊張suMulti-class aibodies： 48T

Ai-CK16 細胞角蛋白16抗體Multi-class aibodies： 0.1ml

Rhesus aibody Rh NSDHL 類固脫氫mei樣蛋白NSDHL抗體  0.2ml

PVDF(Polyvinylidene Fluoride Membrane) PVDF膜/二氟化樹脂膜(膜孔徑:0.45um) 15X20cm

TRIM41 英文名稱： 環指蛋白調節蛋白激meiC蛋白抗體 0.2ml

C9orf135 英文名稱： 9號染色體開放閱讀框135抗體 0.2ml

Ai-CK16 細胞角蛋白16抗體Multi-class aibodies： 0.1ml

Securin 英文名稱： 垂體轉化基因抗體 0.1ml

EXPB-2 英文名稱： 植物延展su-β 1ml

神經元su3抗體 ai-NGN3 0.2ml

Ai-RECK/FITC 熒光su標記金屬蛋白mei抑制因子RECK抗體IgGMulti-class aibodies： 0.2ml

Rhesus aibody Rh Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr421/Ser424) 磷suan化核糖體S6蛋白激meiβ2抗體  0.1ml

5-HTR4(5 hydroxytryptamine serotonin receptor 4) 5-羥色胺受體4抗原Multi-class aibodies： 0.5mg

腸道病毒熒光PCR檢測試劑盒雙甲脒（標準品）側柏葉 石蠟切片組織RyR受體蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

雙甲脒兒茶 RyR受體蛋白表達比色法定量檢測試劑盒

檸檬suan一水大紅袍 RyR受體蛋白表達熒光定量檢測試劑盒

Salubrinal馬尿泡 RyR受體蛋白表達西方雜交分析試劑盒

磷suan伯安喹；磷suan箭根薯RyR受體蛋白共沉淀分析試劑盒

D-熒光su,蟲熒光su甘松RyR受體蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒

麻保;馬波買麻藤（小葉買麻藤） IP3R受體蛋白表達流式儀檢測試劑盒

MK0677，伊布莫侖甲磺suan鹽玉葉金花載玻片IP3R受體蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒

注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。