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RT-PCR 實(shí)驗(yàn)中逆轉(zhuǎn)錄酶三種活性介紹
日期：2025-05-07 02:20
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摘要：
逆轉(zhuǎn)錄酶是存在于 RNA 病毒體內(nèi)的依賴 RNA 的 DNA 聚合酶。
RT-PCR 實(shí)驗(yàn)中的逆轉(zhuǎn)錄酶需要具有以下三種活性：
1. 依賴 RNA 的 DNA 聚合酶活性：以 RNA 為模板合成 cDNA 的第1條鏈；
2. Rnase 水解活性：水解 Rnase 雜合體中的 RNA;
3. 依賴 DNA 的 DNA 聚合酶活性：以一條 DNA 鏈為模板合成互補(bǔ)的雙鏈 DNA
在選擇逆轉(zhuǎn)錄酶時(shí)，建議選擇無 RNaseH①活性（RNaseH-）的逆轉(zhuǎn)錄酶。具有 RNaseH 活性的逆轉(zhuǎn)錄酶的 RNaseH 活性會(huì)與聚合酶活性競爭 RNA 模板與 DNA 引物（或 cDNA 延伸鏈）形成的雜合鏈，并降解...
逆轉(zhuǎn)錄酶是存在于 RNA 病毒體內(nèi)的依賴 RNA 的 DNA 聚合酶。
RT-PCR 實(shí)驗(yàn)中的逆轉(zhuǎn)錄酶需要具有以下三種活性：
1. 依賴 RNA 的 DNA 聚合酶活性：以 RNA 為模板合成 cDNA 的第1條鏈；
2. Rnase 水解活性：水解 Rnase 雜合體中的 RNA;
3. 依賴 DNA 的 DNA 聚合酶活性：以一條 DNA 鏈為模板合成互補(bǔ)的雙鏈 DNA
在選擇逆轉(zhuǎn)錄酶時(shí)，建議選擇無 RNaseH①活性（RNaseH-）的逆轉(zhuǎn)錄酶。具有 RNaseH 活性的逆轉(zhuǎn)錄酶的 RNaseH 活性會(huì)與聚合酶活性競爭 RNA 模板與 DNA 引物（或 cDNA 延伸鏈）形成的雜合鏈，并降解雜合鏈中的 RNA 鏈。被 RNaseH 活性所降解的 RNA 模板不能再作為合成 cDNA 的有效底物，降低了 cDNA 合成的產(chǎn)量與長度。