主營產品：
生化試劑，標準品,對照品，PCR試劑盒，?核酸檢測試劑盒，熒光定量檢測試劑盒，生化試劑盒?，比色法試劑盒，酶活性檢測試劑盒，ELISA試劑盒，酶聯免yi檢測試劑盒，試劑盒，ELISA試劑盒，抗體，重組蛋白，分光光度法檢測試劑盒，細胞株，原代細胞，細胞培養基，標準溶液產品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產品。
咨詢電話：18117197628
如何解決PCR反應低效率或抑制作用？
日期：2025-05-06 13:31
瀏覽次數：18
摘要：
解決PCR反應低效率或抑制作用？
一旦確定反應被抑制或效率較低，則可采取一些步驟將效率值重新調整到理想范圍內。
1、對于抑制作用，可去除模板濃度zui高的反應孔并重新分析標準曲線。如果效率重新回到110% 以下，則分析良好。
2、另一種解決方案是重新純化模板。切記應延長干燥時間，以去除乙醇沉淀過程中的乙醇，或采用另外的柱上洗滌液將離液鹽從硅膠純化物中去除。
3、通過分析優化可解決效率低下的問題。此過程有時相對簡單，但在某些情況下，隨著分析...
解決PCR反應低效率或抑制作用？
一旦確定反應被抑制或效率較低，則可采取一些步驟將效率值重新調整到理想范圍內。
1、對于抑制作用，可去除模板濃度zui高的反應孔并重新分析標準曲線。如果效率重新回到110% 以下，則分析良好。
2、另一種解決方案是重新純化模板。切記應延長干燥時間，以去除乙醇沉淀過程中的乙醇，或采用另外的柱上洗滌液將離液鹽從硅膠純化物中去除。
3、通過分析優化可解決效率低下的問題。此過程有時相對簡單，但在某些情況下，隨著分析復雜度的提高，優化過程可能十分耗時費力。
4、擴增單個產物時，將鎂的濃度提升至6mM 可提高反應效率，但當出現競爭作用時，則應降低鎂的濃度。
5、在某些情況下(主要是多重反應中)，必須采用引物和探針優化基質。此時，需檢測正向引物與反向引物的比值或濃度，有時甚至還需檢測探針比值，以找出分析的理想濃度組合。zui佳引物濃度介于100至600nM之間，而zui佳探針濃度則在100nM至400nM 之間。